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技術(shù)文章

單糖分析指南,Ludger可以提供單糖分析服務

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單糖分析指南如下,Ludger公司可以提供單糖分析的技術(shù)服務


單糖分析是監(jiān)管機構(gòu)在生物制藥表征的產(chǎn)品標準規(guī)格指南中提出的一個要求。單糖分析可用于在藥物開發(fā)的各個階段,作為確定糖基化(N-連接和/O-連接)類型和糖基化程度的方法。它也可以用于證明在實際生產(chǎn)過程中多批次之間大量釋放的質(zhì)量控制檢測的一致性。


較廣泛使用的單糖分析方法如下:

    1. 通過輕度酸水解放糖蛋白上的單糖。

    2. 釋放的單糖用2-氨基苯甲酸(2-AA)進行熒光標記。

    3. 用HPLCUHPLC柱對2-AA標記的單糖進行定量分析。


LudgerTag?單糖釋放和標記試劑盒(貨號:LT-MONO-96)可以提供所有需要的從糖蛋白釋放中性和氨基單糖以及2-AA標記的功能。該試劑盒包含有96個糖蛋白樣品(可用于每個大約50 μg的糖蛋白)的試劑和材料。


它包括含6個單糖單獨混合的定量標準品。該單獨混合標準品能校準試驗儀器,從而可以定量的確定糖蛋白的單糖組成。


我們建議用五點校準曲線為此標準品進行校準,這在試劑盒說明書中有詳細說明。


木糖是一種通常存在于植物和昆蟲的單糖,但不是哺乳動物或酵母表達載體的單糖。此試劑盒也包含了木糖。它可以被用來作為內(nèi)參使用(即在標記之前加入到每個樣品)。這樣能補償樣品在處理過程中發(fā)生的任何移液或樣品制備誤差的損失。我們還建議純化糖肽標準品,是LudgerBioQuant?*量化的標準品,作為陽性對照。


這個定量標準品(貨號:BQ-GPEP-A2G2S2-10U)是一個復雜的N-連接雙觸角聚糖,終止于兩個N-乙酰氨基酸。使用此標準品將可以檢查聚糖的釋放、標記和回收的有效性,并可以增加您的單糖測定準確性。


根據(jù)您實驗室的需求,我們提供兩種色譜柱對標記的單糖進行分析。如果使用液相色譜法(HPLC),我們建議使用LudgerSep?R2柱(貨號: LS-R2-4.6×150),它能有效的分離在大部分N-連接和O-連接聚糖中存在的七個主要單糖。如果使用超液相色譜(UHPLC),我們建議使用LudgerSep?UR2柱(貨號: LS-UR2-2.1x50),它可在8分鐘內(nèi)分離每個樣本。參見圖1



1:用LudgerSep UR2 UHPLC色譜柱(貨號: LS-UR2-2.1x50)分離的2-AA標記單糖標準品。以下單糖都在8分鐘內(nèi)出峰:氨基葡萄糖(GlcN),氨基半乳糖(GalN),半乳糖(Gal),甘露糖(Man),葡萄糖(Glc),木糖(Xyl)和巖藻糖(Fuc



單糖分析相關(guān)產(chǎn)品

商品型號

英文品名

中文品名

包裝

LT-MONO-96

Monosaccharide Release & Labeling Kit

單糖釋放和標記試劑盒

2 Reaction Sets

LS-R2-4.6x150

LudgerSep R2HPLC Column

R2 HPLC 色譜柱

4.6 x 150 mm

LS-UR2-2.1x50

LudgerSep uR2UHPLC Column-monosaccharide

uR2 UHPLC 色譜柱-單糖

2.1x 50 mm

LS-R-BPTX10

LudgerSepR BPT Solvent

10BPT溶液

50ml

CM-MONOMIX-10

Mix of six monosaccharide quantitative standards (glucosamine, galactosamine, galactose, mannose, glucose/dextroseand fucose )

6個單糖混標準品 (葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和巖藻 )

10 nmol

BQ-GPEP-A2G2S2

A2G2S2 glycopeptide standard

A2G2S2 糖肽標準品(用于單糖釋放和標記過程)

10 μg



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